紫外分光光度計的工作原理是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器，常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。無論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門,分光光度計督有廣泛而重要的應(yīng)用。
紫外分光光度計常用于定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波長260nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一，因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應(yīng)的系數(shù)。如：1OD的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。
紫外分光光度計對工作環(huán)境的要求如下。
①儀器應(yīng)安放在干燥的房間內(nèi)，使用溫度為5-35℃.相對濕度不超過85%。
②儀器應(yīng)放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上，且避免強烈的振動或持續(xù)的振動。
③室內(nèi)照明不宜太強，且應(yīng)避免直射日光的照射。
④電扇不宜直接向儀器吹風(fēng)，以防止光源燈因發(fā)光不穩(wěn)定而影響儀器的正常使用。
⑤盡量遠離高強度的磁場、電場及發(fā)生高頻波的電器設(shè)備。
⑥供給儀器的電源電壓為AC220V±22V，頻率為50Hz±1Hz，并必須裝有良好的接地線。推薦使用功率為1000w以上的電子交流穩(wěn)壓器或交流恒壓穩(wěn)壓器，以加強儀器的抗干擾性能。
⑦避免在有硫化氫等腐蝕性氣體的場所使用。
